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    ISRE-Luc/Raw264.7

    CBP74098

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    I. Background
          STING(干扰素基因刺激因子)又称 MPYS、TMEM173、MITA 和 ERIS,是一种跨膜 蛋白,是环状二核苷酸(CDN)的直接传感器。CDN 是细菌信号转导中普遍存在的第二信 使分子,是哺乳动物细胞的防御触发器。当细菌病原体攻击时,释放到细胞中的 CDN 直 接与 STING 结合,激活的 STING 和 TANK 结合激酶-I (TBK1) 相互作用以诱导活性干 扰素调节因子 (IRF3)二聚体,然后该二聚体与细胞核中的干扰素刺激反应元件 (ISRE) 结合并导致 IFN-α/β 的产生。IFNβ的产生是 STING 活化的标志。肿瘤微环境(TME)中由 于天然免疫产生的信号传导是导致肿瘤特异性 T 细胞激活和肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL) 浸润的关键因素。其中尤其以 I 型 IFN 对肿瘤特异性 T 细胞的活化最为关键。因此, STING 激动剂可以顺利获得诱导Ⅰ型干扰素基因的表达,激活包括树突状细胞等免疫刺激细胞, 改变肿瘤微环境并诱导肿瘤特异性 T 细胞的产生,从而顺利获得调节免疫系统达到抗肿瘤的目的。
     
    II. Description
          ISRE-Luc RAW264.7 报告基因细胞,是由 ISRE 调控并表达 Luc 荧光素 酶报告基因的 RAW264.7 细胞。RAW264.7 是小鼠巨噬细胞的常用模型,用于研究细胞对 微生物及其产物的反应。RAW 264.7 衍生细胞内源性表达许多 PRR,包括 toll 样受体 (TLR)、NOD 样受体 (NLR)、RIG-I 样受体 (RLR) 和 C 型凝集素受体 (CLR)。 STING 激活的原理见下图所示。
     



    Figure 1. ISRE-Luc/Raw264.7细胞模型原理图
     
    III. Introduction
    Host Cell: Raw264.7
    Expressed gene:
    ISRE-Luciferase
    Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
    Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
    Culture Medium: DMEM+10% HI-FBS+200 μg/ml Zeocin+100 μg/ml Normocin
    Mycoplasma Testing: Negative
    Storage: Liquid nitrogen
    Application(s): Functional(Report Gene) Assay
     
    IV.. Description of Host Cell Line
    Organism: Mus musculus, mouse
    Tissue: Abelson murine leukemia virus-induced tumor; ascites
    Disease: Abelson murine leukemia virus-induced tumor
    Morphology: Monocyte/macrophage
    Growth Properties: Adherent
     
    V. Representative Data

    Figure 2. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001(we strongly suggest to purchase from Cobioer).  Dose Response of 2'3-cGAMP in ISRE-Luc RAW264.7(C1).

     

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