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    CCR4/β-Arrestin/CHO

    CBP71349

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    I. Background

          CCR4(又称 CD194、CMKBR4)是编码 CC 趋化因子受体 4 的蛋白编码基因,属于 G 蛋白偶联受体家族的关键成员。该基因主要在 Th2 细胞、调节性 T 细胞(Tregs)等 T 细胞亚群中选择性表达,在 B 细胞、NK 细胞、巨噬细胞中也有少量表达,同时在成人 T 细胞 白血病/淋巴瘤(ATLL)等多种肿瘤细胞中存在高表达。其编码的受体与 CCL17、CCL22 等配体结合后,可激活 ERK、MAPK、PI3K-AKT 等下游通路,调控免疫细胞定向迁移、细胞趋化与活化,参与免疫稳态维持、炎症反应等生理过程。

          该基因异常与过敏性炎症、自身免疫病(哮喘、类风湿性关节炎)、多种恶性肿瘤的发生开展密切相关,是重要的药物靶点,已有靶向单克隆抗体莫格利珠单抗获批用于相关淋巴瘤的治疗。

     
    II. Description

          CCR4 β-Arrestin CHO 报告基因药靶模型很好的模拟了体内 CCR4/β-Arrestin的信号转导过程,原理见下图所示。当缺乏配体刺激时,β-Arrestin 不与 CCR4 结合,融合β-Arrestin 的 荧光素酶处于失活构象,当 CCR4 遭遇配体刺激时,融合荧光素酶报告基因的β-Arrestin 被招募,使荧光素酶报告基因处于激活状态,加入其底物后发光信号增强。
     



    Figure 1. 
    CCR4 β-Arrestin CHO 细胞模型原理图

     
    III. Introduction
    Host Cell:

    CHO

    Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
    Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
    Culture Medium: F12K+10%FBS+5μg/ml Puromycin+5μg/ml Blasticidin
    Mycoplasma Status: Negative
    Storage: Liquid nitrogen immediately upon delivery
    Application(s):

    Functional assay for CCR4

    Transducer: β-Arrestin
     
    IV. Description of Host Cell Line
    Organism: Hamster
    Tissue: Ovary
    Morphology: Epithelial
    Growth Properties: Adherent
     
    V. Representative Data


    Figure 2. Recombinant CCR4/β-Arrestin/CHO constitutively expressing CCR4.


    Figure 3. Dose Response of Recombinant Human CCL22 in CCR4 β-Arrestin CHO(C12).

    Figure 4. Inhibition of CCL22-induced beta-Arrestin Recruitment in CCR4 β-Arrestin CHO (C12).


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